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你知道UHPLC操作中常见故障怎么解决吗?

来源:深圳市恒谱生科学仪器有限公司   2025年09月26日 08:01   5

首先我们要知道UHPLC 是什么,它的全称是超高效液相色谱(Ultra-High Performance Liquid Chromatography),是色谱分离科学中的一个全新类别与新技术。在制造技术、扩散体积和耐受压力方面进行了优化,采用小颗粒的固相,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量,限度的发挥色谱性能。

色谱仪器作为一种精密仪器,一些不正确的操作或者忽视的实验步骤,会导致仪器分析效果的不佳,甚至对仪器造成伤害。其中,最多出现的一些柱压、漂移和峰型异常的问题,比如鬼峰、肩峰、峰型不准等。

故障1:出现肩峰

可能是样品浓度太高,有浓度超载的情况。可以用流动相配样,总的样品体积小于峰的15%。如果样品溶剂过强则采用较弱的样品溶剂。也可能是出现了色谱柱塌陷的问题,如果出现了柱塌陷可以更换色谱柱或者打开进液端,用和柱填料相同的固定相修补。也可能是由于样品中有一个和它极性非常接近的物质,两者没办反分离,所以就出现了肩峰的状况。

故障2:出现鬼峰

对于等度色谱来说,出现鬼峰的原因主要是回收流动相、过载和沉淀、流路产生;对于梯度色谱,主要原因是溶液中有杂质的情况以及样品中含蛋白质。很多情况下鬼峰的出现都是由于杂质颗粒物、蛋白质沉淀物和化学污染物引起的。在市场上有多款产品主要是针对固体颗粒物的拦截,但是对引起鬼峰出现的有机污染物却不能起到拦截效果。恒谱生精心研发出一款可以有效吸附去除系统中的极性较弱的杂质,从而防止系统中的杂质峰对目标峰的干扰。其安装在梯度混合器和进样器之间,不仅能够去除流动相中的杂质,还可以有效的去除管路和混合器中的杂质。

故障3:出现峰拖尾

出现峰拖尾的现象情况有很多,比如样品进样量过大,或者是样品浓度太高导致柱超载,这时应该降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相。

也可能是死体积或柱外体积过大,色谱柱柱效下降、柱头塌陷等情况,可以更换合适的色谱柱,或者在色谱柱前加一个保护柱。可以起到截留导致色谱柱筛板堵塞、柱头塌陷和柱效下降的化学物质和颗粒物。样品和流动相的过滤可以维护保护柱对化学污染物的吸附容量,能够更长时间的维护柱效。

关键词:PLC 色谱柱
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