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泄漏是 HPLC 分析中的常见问题。为了限度地减少系统中的泄漏,请尽量选择相同制造商的硬件。如果安装不兼容的接头,分离过程中可能会出现问题,重复连接可能最终导致接头泄漏。如果需要更换,请使用适当的适配器并在实验之前检查所有连接是否泄漏。
是另一个常见的 HPLC 故障问题,想要从一开始就尽量减少此问题,请使用柱前过滤器和色谱保护柱。恒谱生的在线过滤器和保护柱能够过滤掉流动相中的污染物,保护色谱柱免受样品溶液中析出沉淀物的危害。
平时要清洁进样口,首先断开并反转色谱柱,将其连接到泵(但不连接到检测器),并以两倍标准流速向泵送溶剂。大约 5-10 柱体积的溶剂应该足以去除入口筛板上的少量颗粒材料。最后使用标准测试混合物评估清洗过的的性能。
恒谱生建议定期更换。有时溶剂冲洗和恢复程序都不能恢复色谱柱的性能。如果您已经将色谱柱确定为问题源,并且其他色谱柱的修复程序失败,那可能存在填料中的空隙或入口筛板阻塞。作为最后的手段,打开色谱柱的入口端。注意:打开入口端,尤其是打开出口端,可能会损坏填料床。在打开之前,请查阅制造商的文献。
故障排除。断开色谱柱与系统的连接。为防止填料从色谱柱中渗出,请尽快执行后续步骤。使用虎钳和扳手,或两个扳手,小心地拆下入口端接头。如果熔块留在接头中,通过在硬表面上敲击接头将其移出。如果筛板留在柱子上,请将其滑下而不是提起。这将有助于保持填料床的完整性。
如果是模块化色谱柱可能需要特殊工具来移除筛板盖。检查旧熔块。将筛板压在不锈钢管上会在正确安装的的柱侧边缘周围留下一个环。没有环可能意味着套圈太靠近管端。由此产生的松散连接可能会泄漏二氧化硅或充当混合室。检查填料床。如果它凹陷或断裂,则需要一个新柱。更换滤芯。更换末端接头。用手拧紧,然后用扳手拧紧 1/4 圈。
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